消毒学实验常见考点及课件

竞赛常见考点

微生物抵抗力排序（由高到低）

朊病毒＞细菌芽孢（炭疽杆菌芽孢、枯草杆菌芽孢等）＞分枝杆菌（结核分枝杆菌、龟分枝杆菌等）＞亲水病毒（无脂质包膜，如脊髓灰质炎病毒）＞真菌＞细菌繁殖体＞亲脂病毒（有脂质包膜，如乙型肝炎病毒等）

常用试验菌株及代表意义

1. 金黄色葡萄球菌 (ATCC 6538)：细菌繁殖体中化脓性球菌代表，医院感染常见细菌繁殖体代表
2. 大肠杆菌：细菌繁殖体中肠道菌代表
3. 白色葡萄球菌 (8032)：空气中细菌代表
4. 白色念珠菌 (ATCC 10231)、黑曲霉菌 (ATCC 16404)：致病性真菌代表
5. 龟分枝杆菌脓肿亚种 (8099)：人结核分枝杆菌代表
6. 铜绿假单胞菌 (ATCC 15442)
7. 枯草杆菌黑色变种芽孢 (ATCC 9372)、嗜热脂肪杆菌芽孢 (ATCC 93326)：细菌芽孢代表
8. 脊髓灰质炎病毒 -Ⅰ 型疫苗株：病毒代表

培养基选择

（一）基础培养基及用途

1. 胰蛋白胨大豆琼脂培养基 (TSA)：用于菌落计数
2. 胰蛋白胨大豆肉汤培养基 (TSB)：用于载体滴染法染菌、菌液稀释
3. 普通营养琼脂、营养肉汤培养基：用于菌悬液制备
4. 需氧 - 厌氧菌培养基、真菌培养基：用于无菌检验

（二）真菌专用培养基

沙堡琼脂培养基、麦芽浸膏琼脂培养基（用于白色念珠菌、黑曲霉菌培养）

（三）病毒培养液

细胞培养液、细胞维持液（含 2% 血清）、细胞生长液（含 10% 血清）

（四）其他专用培养基

分支杆菌干燥培养基等

培养温度与培养时间

试验载体选择规则

1. 无特殊要求：载体定量试验优先选用布片；
2. 手术器械：选用不锈钢片；
3. 物体表面：选用棉布片；
4. 非金属管腔、光滑表面：选用聚四氟乙烯片（管）、玻璃片；
5. 气体消毒、雾化消毒：禁止使用布片、滤纸片等具备吸附能力的载体，统一选用金属载体；
6. 普通医疗器械灭菌试验：以不锈钢片为载体；特殊器械可选用玻璃片、聚四氟乙烯片（管）等。

模拟现场试验载体 / 试验对象选择

试验对象原则上选取同类物品中最难达到消毒合格的品类：

1. 医疗器械消毒 / 灭菌：止血钳齿端；
2. 皮肤消毒：人体前臂屈面皮肤；
3. 手消毒：五指屈面；
4. 织物消毒：棉布；
5. 瓜果蔬菜消毒：带刺突的普通黄瓜；
6. 餐具消毒：竹（木）筷、瓷质碗盘；
7. 一般物品表面消毒：木质、塑料、橡胶、玻璃等材质表面。

现场试验评价规定

1. 通用标准：消毒后自然菌平均杀灭率≥90%，判定消毒合格；阴性对照组必须无菌生长。
2. 手现场消毒：30 人次手上自然菌平均杀灭率≥90%，判定合格。
3. 外科手消毒：30 人次手上自然菌平均杀灭率≥90%，且每人次单只手残留菌量＜150 CFU，判定消毒合格。

无菌操作规范

1. 试验开始前：采用湿式方法清洁实验台面、清扫室内地面；
2. 人员防护：常规穿戴工作服、防护鞋、口罩、帽子；开展大件产品无菌实验时，额外穿戴无菌隔离衣、鞋套；
3. 无菌器材、试剂：经高压灭菌或过滤灭菌处理；
4. 应急处置：发生微生物培养物打碎、试验微生物泄漏等事故，立即停止操作，对污染区域及波及区域全面消毒；
5. 试验收尾：全部试验结束后，对实验室整体环境进行消毒处理。