课件私享会9|引物设计微专题(纯手搓版)

1. 课件私享会2｜表观遗传微专题（纯手搓版）

2. 课件私享会6 |实验分类与设计专题（1）——基础实验与经典实验（需付豆，慎入）

3. 课件私享会3｜抗体制备专题（纯手搓版）

4. 课件私享会4｜疫苗类型微专题（纯手搓版）

5. 课件私享会8|实验分类与设计专题（2）——设计思路与变量分析（需付豆，慎入）

7. 课件私享会7|生命系统的信息传递微专题（纯手搓版）

下面的知识框架图，里面提供了每个模块下对应设置的一部分专题内容，供参考查看！

1、引物书写一定要遵循：5'→3'方向书写，且必须标注方向。这是因为DNA聚合酶只能从引物的3'端延伸，即5'→3'的方向延伸。

2、如果要添加修饰的碱基，只能在5'端进行添加。3'端严禁添加任何附加序列。

3、在5'端添加的不一定是限制酶，还可以添加其它序列。这些其它序列主要有以下：保护碱基、酶切位点、标签序列、荧光基团

4、添加其它序列的顺序如下：5'→保护碱基→酶切位点→核心互补序列→3'

5、左边的引物按4方向来写，而右边的引物，一定也要写成5'→3'。即使你写的时候是下列顺序。3'←核心互补序列←酶切位点←保护碱基←5'

6、磷酸基团为5'端，-OH为3'端

【2020江苏卷，第33题】如果已知一小段DNA的序列，可采用PCR的方法，简捷地分析出已知序列两侧的序列，具体流程如下图（以EcoRI酶切为例）：

请据图回答问题：

（1）步骤I用的EcoRI是一种_______酶，它通过识别特定的_______切割特定位点。

（2）步骤Ⅱ用的DNA连接酶催化相邻核苷酸之间的3＇－羟基与5＇－磷酸间形成_______；PCR循环中，升温到95℃是为了获得_______；TaqDNA聚合酶的作用是催化_______。

（3）若下表所列为已知的DNA序列和设计的一些PCR引物，步骤Ⅲ选用的PCR引物必须是_______（从引物①②③④中选择，填编号）。

	DNA序列（虚线处省略了部分核苷酸序列）
已知序列
PCR引物	①5′－AACTATGCGCTCATGA－3′ ②5′－GCAATGCGTAGCCTCT－3′ ③5′－AGAGGCTACGCATTGC－3′ ④5′－TCATGAGCGCATAGTT－3′

（4）对PCR产物测序，经分析得到了片段F的完整序列。下列DNA单链序列中（虚线处省略了部分核苷酸序列），结果正确的是_______。

A．5′－AACTATGCG-----------AGCCCTT－3′

B．5′－AATTCCATG-----------CTGAATT－3′

C．5′－GCAATGCGT----------TCGGGAA－3′

D．5′－TTGATACGC----------CGAGTAC－3′

【答案】    (1). 限制性核酸内切（或限制）   (2). 核苷酸序列    (3). 磷酸二酯键   (4). DNA单链    (5). 以DNA为模板的DNA链的延伸    (6). ②④    (7). B

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目前另有文章，可配合微专题课件使用，已更新的二轮专题如下：

0. 二轮微专题0|“选题”遵循原则

更多内容陆续更新中，敬请期待～～

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